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Mouse IL-12/IL-23 total p40 ELISA Kit

时间:2016-10-27 04:58:28来源:本站 作者:admin 点击:265次


【项目简介】
白细胞介素12(IL-12)又名自然杀伤细胞刺激因子(nature killer stimulating factor,NKSF)、细胞毒性淋巴细胞成熟因子(cytotoxic lymphocyte maturation factor,CLMF)。IL-23是另一种异源二聚体细胞因子,它和IL-12的生物学功能相似又有显著的差异。IL-12主要由巨噬细胞、B细胞产生,对T细胞核自然杀伤细胞有多种作用。小鼠的IL-12对人细胞有活性,人IL-12对小鼠无活性。IL-12和IL-23是属于IL-12细胞因子家族的分泌型异二聚体糖蛋白,它们共享p40(40kDa)亚基,由二硫桥连接形成异源二聚体,IL-12由p35(35kDa)和p40组成,IL-23由P19(19 kDa)和p40组成。p40除了作为IL-12或IL-23的组成部分,还能以游离的单体和二聚体存在。表达p40的哺乳动物细胞包括巨噬细胞,树突细胞,单核细胞,朗格汉斯细胞,嗜中性粒细胞,角化细胞,小胶质细胞等。在同时表达p40和IL-12特异性的p35亚基的细胞中,游离p40的分泌量为异源二聚体IL-12的10-1000倍。
 
【检验原理】
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。酶标微孔板上预包被有抗小鼠IL-12/23p40抗体,当加入标准品和待测样本时,重组或天然的小鼠IL-12/23p40会和该抗体结合。洗板后,游离的其他成分被洗去,加入生物素化的抗小鼠IL-12/23p40抗体可与被酶标板捕获的小鼠IL-12/23p40结合。再次洗板后,游离的其他成分被洗去,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素,生物素和链霉亲和素特异性结合,形成“包被抗小鼠IL-12/23p40抗体+小鼠IL-12/23p40+生物素化抗小鼠IL-12/23p40抗体+链霉亲和素-HRP”免疫复合物。当加入TMB显色底物后,复合物上连接的HRP催化底物反应,生成蓝色产物,终止反应后变为黄色。在450nm处测定OD值,小鼠IL-12/23p40浓度与OD450值之间呈正比,可通过绘制标准曲线求出标本中小鼠IL-12/23p40的浓度。


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